?飲用水中大腸桿菌檢測(cè)方法是什么

大腸桿菌是比較常見(jiàn)的細(xì)菌，對(duì)于人體是有害的，常見(jiàn)于我們的飲用水當(dāng)中，要是長(zhǎng)時(shí)間的飲用含有大腸桿菌的水的話，對(duì)于身體的傷害是很大的。對(duì)此，要檢查水中的大腸桿菌。那飲用水中大腸桿菌檢測(cè)方法是什么？這個(gè)問(wèn)題，很多的朋友都很好奇，下面就為大家簡(jiǎn)單的介紹一下。

飲用水中大腸桿菌檢測(cè)方法是什么？

1、飲用水中大腸桿菌快速檢測(cè)方法，其特征在于包括以下步驟：

(1)水樣中微生物的收集及其DNA的提?。?采用滅菌后的濾膜或?yàn)V器過(guò)濾水樣，在裝有無(wú)菌水的EP管中，洗滌濾膜，離心， 棄上清液，備用;

(2)水樣中微生物DNA的提?。?A、向EP管中加入TE緩沖液，使之重懸; B、加入SDS和蛋白酶K，混勻，溫育45min～1h; C、加入氯仿/異戊醇，混勻，離心，將上清液轉(zhuǎn)入一個(gè)新EP管中; D、加入等體積的酚/氯仿/異戊醇，混勻，離心，將上清液轉(zhuǎn)入一個(gè)新EP管中; E、加入異丙醇，輕輕混合直到DNA沉淀下來(lái)，離心; F、棄上清，沉淀物用乙醇洗滌，晾干; G、將沉淀重溶于TE緩沖液，搖勻; H、用紫外分光光度計(jì)測(cè)定提取的基因組DNA模板的0D值，計(jì)算其DNA濃度，計(jì)算方 法為： DNA濃度(μg/μL)=OD值260nm×樣品稀釋倍數(shù)×50/1000 I、將基因組DNA模板做好標(biāo)記，貯存，備用;

(3)PCR擴(kuò)增; 反應(yīng)引物： 上游引物：5’-tgttcagtggcaagagtt-3’ 下游引物：5’-taatcgatatacccgctc-3’ 50μL反應(yīng)體系： 10×PCR緩沖液5μL Tag酶2U/μL1μL MgCl2(25mM)5μL dNTP(2.5MM)5μL ddH2029μL 上游引物10μM2μL 上游引物10μM2μL 模板DNA1.5μg/μL1μL

(4)產(chǎn)物觀察： A、凝膠的準(zhǔn)備：先配置瓊脂糖溶液，加熱，使其充分溶解，再加入溴化乙錠溶液; B、配置TAE電泳液; C、倒膠：將配置好的瓊脂糖溶液倒入膠板中，待其凝固后，放入電泳槽中; D、電泳：將擴(kuò)增好的PCR產(chǎn)物與緩沖液按比例混合，加入到凝膠加樣孔中，同時(shí)加入 DNA分子量標(biāo)準(zhǔn)，接通電源，設(shè)定電壓和電流，開(kāi)始電泳。 E、觀察;將擴(kuò)增產(chǎn)物在紫外光下觀察，拍攝圖片。

上文就是關(guān)于飲用水中大腸桿菌檢測(cè)方法是什么的介紹，現(xiàn)在大家了解了吧！其實(shí)可要我們不喝生水，飲用經(jīng)過(guò)燒開(kāi)的水，就沒(méi)有這些問(wèn)題了。這就是為什么總是提倡大家和涼開(kāi)水的原因。而且多喝涼開(kāi)水對(duì)身體是很有好處的，無(wú)論是男女老少。